以神經內肽酶為靶點篩選治療阿爾茨海默癥天然藥物的實驗研究
發布時間:2025-08-22 點擊:45
目的篩選具有提高神經內肽酶(nep)活性從而降低神經細胞β-淀粉樣肽(aβ)水平的藥物,為臨床治療阿爾茨海默癥(ad)提供實驗依據。方法以脂質體lipofectaminetm2000介導瑞典突變型淀粉樣肽前體蛋白(sweapp)表達質粒pcdna3.1-sweapp轉染神經母細胞瘤細胞sk-n-sh,g418篩選獲得穩定表達細胞株作為ad模型細胞,采用蛋白印跡技術檢測sweapp表達情況,酶聯免疫吸附試驗(elisa)檢測細胞培養基中a4β0和a4β2含量變化,進而以mtt法檢測各天然藥物對sk-n-sh細胞增殖能力的影響,確定藥物的有效濃度及最佳作用時間,以nep肽酶實驗檢測藥物對nep酶活性影響,elisa法檢測藥物對aβ水平的影響。結果western blot結果顯示,轉染后sk-n-sh細胞高表達sweapp蛋白;elisa結果顯示,轉染后的sk-n-sh細胞分泌a4β0、a4β2明顯升高,分別為轉染前的7.26和3.27倍(p<0.05)。nep肽酶實驗檢測結果顯示,茶多酚、人參皂苷rb1、rg3能夠明顯提高nep酶活性,分別為(117±2.8)%(、131±4.0)%和(121±1.6)%。eli...完成機構:山東大學醫學院生物化學與分子生物學研究所 山東大學附屬濟南市中心醫院